Kāds ir primārās antivielas mērķis Western blot?
Kāds ir primārās antivielas mērķis Western blot?

Video: Kāds ir primārās antivielas mērķis Western blot?

Video: Kāds ir primārās antivielas mērķis Western blot?
Video: Вестерн-блоттинг - теория и метод 2024, Jūlijs
Anonim

Izmantojot tiešās noteikšanas metodi, fermentu vai fluoroforu konjugēts primārā antiviela izmanto, lai noteiktu interesējošo antigēnu blot . Netiešās noteikšanas metodē nemarķēts primārā antiviela vispirms izmanto, lai saistītos ar antigēnu.

Turklāt, kas ir primārā antiviela Western blot?

The primārā antiviela atpazīst un saista interesējošā proteīna epitopu vai specifisko aminoskābju secību. Sekundārā antivielas izmanto rietumu blotēšana parasti ir konjugēti ar fermentu; visbiežāk izmantotie fermenti ir mārrutku peroksidāze (HRP) un sārmainā fosfatāze (AP).

Turklāt, ko dara primārā antiviela? Primārās antivielas ir imūnglobulīni, kas saistās ar noteiktu antigēnu ( proteīns , peptīds, maza molekula utt.), un tie parasti nav konjugēti. Laba primārā antiviela atpazīst un saistās ar augstu afinitāti un specifiskumu, lai attīrītu, noteiktu un izmērītu antigēnu.

Līdz ar to kāds ir Western blot mērķis?

A western blot ir laboratorijas metode, ko izmanto noteiktu proteīnu molekulu noteikšanai no olbaltumvielu maisījuma. Pēc tam olbaltumvielu molekulas tiek atdalītas pēc to lieluma, izmantojot metodi, ko sauc par gēla elektroforēzi. Pēc atdalīšanas proteīni tiek pārvietoti no gēla uz a blotēšana membrāna.

Kā antivielas tiek izmantotas Western blotēšanā?

Antivielas ir lietotas lai noteiktu mērķa proteīnus uz western blot (imūnblots). The antivielas ir konjugēti ar fluorescējošām vai radioaktīvām etiķetēm vai fermentiem, kas pēc tam reaģē ar pielietotu reaģentu, izraisot nokrāsu vai gaismas izstarošanu, kas ļauj noteikt.

Ieteicams: